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考马斯亮蓝g-250染色法测定蛋白质含量与其他方法相比有什么优缺点
蛋白质的存在影响酸碱滴定中所用某些指示剂的颜色变化,从而改变这些染料的光吸收。在些基础上发展了蛋白质染色测定方法。涉及的指示剂有甲ji橙、考马斯亮蓝、xiu甲fen绿和xiu jia酚紫。目前广泛使用的染料是考马斯亮蓝。
考马斯亮蓝G-250在酸性溶液中为棕红色,当它与蛋白质通过范德华键结合后,变为蓝色,且在蛋白质一定浓度范围内符合比尔定律,可在595nm处比色测定。2—5分钟即呈da光吸收,至少稳定1小时。在0.01—1.0 mg蛋白质/ml范围内均可。该法操作简便迅速,消耗样品量少,但不同蛋白质之间差异大,且标准曲线线性差。高浓度的Tris、EDTA、尿素、甘油、蔗糖、bing酮、硫酸铵和去污剂时测定有干扰。缓冲液浓度过高时,改变测定液pH值会影响显色。考马斯亮蓝染色能力强,比色杯不洗干净会影响光吸收值,不可用石英怀测定
性状亮蓝为有金属光泽的深紫色至青铜色颗粒或粉末,无臭。易溶于水,水溶液呈亮蓝色;可溶于乙醇、丙二醇和甘油。耐光性、耐热性、耐酸性、耐盐性和耐微生物性很好,耐碱性和耐氧化还原特性较佳。弱酸时呈青色,强酸时呈黄色,在沸腾碱液中呈紫色 [1] 。性能亮蓝的色度极强,通常都是与其他食用着色剂配合使用,使用量小,在0.0005%~0.01%之间 [1] 。应用根据我国《食品添加剂使用卫生标准》(GB2760-1996)中规定:亮蓝可用于果味型饮料(液、固体)、果汁型饮料、汽水、配制酒、糖果、糕点上彩装、红绿丝、罐头、浓缩果汁、青梅、对虾片,使用量为0.025g/kg;冰淇淋,使用量为0.021999g/kg。红绿丝的使用量可加倍;果味粉着色剂加入量按稀释倍数的50%加入 [1] 。
亮蓝的饱和度极强,一般全是与别的食用着色剂相互配合应用,需求量小,在0.0005%~0.01%中间。装饰艺术蔬菜水果、可制品、巧克力朱古力制品(包含可可脂朱古力及制品)及其糖果(05.01.01可制品、05.04装饰设计糖果、顶饰和甜汁以外)、点心上彩装。客户在应用本产品前要认真阅读GB2760《食用添加剂应用质量标准》,每个纯色种类的应用范畴和需求量会大不一样。亮蓝,别名食用蓝色1号(日本国)、食用蓝色2号,属水溶非甲酰胺类着色剂。化学式C37H34N2Na2O9S3,相对分子质量792.86。亮蓝为食用蓝色黑色素,归属于人造黑色素,是由邻磺酸与N--N-(3-磺基苄基)-经缩合反应、空气氧化而制取的。归属于甲酰胺类物质。可在食品类、、护肤品等制造行业中作着色剂用。食品企业中适用点心、糖果、饮品等的上色。
以上信息由专业从事玻璃水亮蓝价格的富舜新材料于2024/6/6 11:27:10发布
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